Resumen:
Las GTPasas son enzimas que regulan diversas funciones celulares actuando como interruptores moleculares. Dentro de la familia de las GTPasas, las GPN (Glycine-Proline-Asparagine) son esenciales en eucariotas, participando en la regulación y acumulación nuclear de la RNA polimerasa II (RNAPII). En este estudio, se investigó el papel del dominio WH2 de la GTPasa Gpn3 en la interacción con actina globular y su influencia en la formación de lamelipodios y migración celular en líneas MCF-12A.
Se realizó un modelado in-silico utilizando HADDOCK 2.4, revelando una posible interacción entre el dominio WH2 de Gpn3 y la actina globular. Adicionalmente, se construyó la mutante Gpn3RFlag-L69A/R70A, confirmando su expresión y estabilidad en líneas celulares. Los ensayos experimentales indicaron que esta mutación afecta la formación de lamelipodios, mostrando una tendencia a reducir su formación bajo condiciones de ayuno y aumentar bajo estímulo con medio completo, en comparación con la variante salvaje. Sin embargo, no se observaron diferencias significativas en la migración celular entre las líneas estudiadas, sugiriendo que la mutación en el dominio WH2 de Gpn3 no compromete su función en la migración celular, aunque sí parece influir en la regulación de la actina bajo ciertos estímulos. Estos hallazgos proporcionan nuevos conocimientos sobre el papel del dominio WH2 de Gpn3 en la dinámica del citoesqueleto de actina.
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