Evaluación de la actividad enzimática y expresión de NAT1 y NAT2 en linfocitos T de pacientes con diabetes mellitus tipo 2 con sobrepeso u obesidad

Abstract

La inflamación crónica de bajo grado como consecuencia de la infiltración de linfocitos, síntesis de citocinas y la disminución de células T reguladoras es característico de enfermedades metabólicas como la diabetes mellitus tipo 2 (DM2) y la obesidad. Factores involucrados en la resistencia a la insulina son las enzimas citosólicas N-Acetil Transferasas 1 y 2 (NATs), las cuales transfieren un grupo acetil del acetil-CoA a un substrato xenobiótico. Las NATs son reguladas a nivel genético, epigenético y por enzimas desacetilasas como las sirtuínas que pueden promover su degradación. Sin embargo, se desconoce la función de estas enzimas y su regulación por SIRT1 o por presencia de polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) en enfermedades metabólicas como la DM2 asociada con el sobrepeso y obesidad. Se evaluó la expresión enzimática de NAT1, NAT2 y SIRT1 de linfocitos T CD3+ de pacientes con DM2 con sobrepeso y obesidad por citometría de flujo, así como la actividad enzimática de las NATs mediante cultivos celulares y analisis por HPLC. Además, se determinó el fenotipo acetilador de los sujetos de estudio mediante la evaluación de seis SNPs mediante genotipificación. Se reclutó un total de 17 pacientes con diagnóstico de DM2 y 15 sujetos aparentemente sanos con una edad promedio de 55 (34-78) y 47 años (32-65) respectivamente. En cuanto a la expresión enzimática, se encontró un aumento de NAT2 (p=0.0002) en los pacientes con DM2 en comparación al grupo control mientras que NAT1 y SIRT1 se correlacionaron de manera negativa con el IMC (r=-0.5147 p<0.0366; r=-0.5147 p=0.0533, respectivamente). En contraste, se encontró una disminución significativa en la actividad de NAT2 de los pacientes con DM2 en comparación al grupo control (p=0.0160), la inhibición de sirtuínas aumentó la actividad de NAT2 (p<0.0001) mientras que el agonismo de sirtuínas disminuyó la actividad en ambos grupos (p= 0.0052). El efecto regulador de sirtuínas sobre NAT1 en ambos grupos de estudio no se detectó. El análisis de SNPs de NAT2 mostró una mayor frecuencia de haplotipos de acetilación rápida en los pacientes con DM2 (p=0.0463; OR 2.956, 95% CI 1.03-8.56) y la expresión enzimática de las células CD3+/NAT2+ fue mayor en el grupo de acetiladores rápidos en comparación al grupo de acetiladores lentos (p=0.0200). Los resultados indican de forma preliminar que NAT2 pudiera estar implicada en procesos metabólicos relacionados con el desarrollo de DM2 mientras que NAT1 en sobrepeso y obesidad.