Desarrollo y evaluación de conjugados antigénicos basados en nanopartículas de oro para inmunización contra SARS-CoV-2

Abstract

Esta tesis doctoral tuvo como objetivo el diseño, caracterización y evaluación preclínica de conjugados antigénicos basados en AuNP funcionalizadas con péptidos derivados de la proteína espícula (Spike, proteína S) del SARS-CoV-2, con el fin de explorar su potencial como nanovacunas. La metodología incluyó la síntesis controlada de AuNP, su funcionalización con polietilenglicol heterobifuncional (PEG) y posterior conjugación con péptidos inmunogénicos. La caracterización estructural y fisicoquímica de los conjugados se llevó a cabo mediante espectroscopía UV-Vis, dispersión de luz dinámica (DLS), espectroscopía infrarroja por transformada de Fourier (FTIR), análisis termogravimétrico (TGA) y microscopía electrónica de transmisión (TEM). Se evaluó la citotoxicidad en líneas celulares y la captación por células dendríticas (DCs), así como la expresión de marcadores de maduración y el perfil de citocinas. Se determinó la inmunogenicidad de los conjugados antigénicos basados en AuNP en términos de la inducción de respuestas humorales y se analizaron los efectos histopatológicos de la inmunización. Los resultados revelaron una alta eficiencia en la conjugación de péptidos, estabilidad coloidal y ausencia de citotoxicidad significativa. Las AuNP fueron eficientemente internalizadas por DCs, induciendo maduración y modulación del perfil inflamatorio, destacando una reducción en la secreción de TNF-α. La evaluación de la respuesta humoral específica evidenció títulos elevados de IgG y de subclases funcionales, sin observarse daño tisular sistémico, salvo una inflamación hepática localizada compatible con efectos inmunomoduladores. En conjunto, los hallazgos de este trabajo experimental sustentan el potencial de las AuNP como plataforma vacunal segura y eficaz, y establecen una base sólida para su optimización y futura evaluación en biomodelos de desafío infeccioso.