Evaluación de los microRNAs miR-1290 y miR-26b como posibles reguladores de NAT1 en plasma de pacientes pediátricos con leucemia linfoblástica aguda

Abstract

La leucemia linfoblástica aguda (LLA) es el cáncer pediátrico más común entre los 5 y 14 años de edad. Alteraciones en la expresión de enzimas metabolizadoras de medicamentos y xenobióticos, como NAT1 modifican la susceptibilidad o riesgo a cáncer, incluido la LLA. Los mecanismos de regulación epigenética, como los miRNAs desempeñan un rol importante en el desarrollo y progresión de la LLA. La alteración en la expresión de los miRNAs altera a su vez la expresión de distintos genes, incluido NAT1. El objetivo de este estudio fue evaluar los niveles de los miRNAs miR-1290 y miR-26b en plasma de pacientes pediátricos con LLA-B y determinar si existe diferencia en su expresión comparados con sujetos control. La expresión relativa de miR-1290 y miR-26b circulantes fue detectada por medio de RT-qPCR y determinada con el método 2−ΔCT en plasma de pacientes con LLA-B (n=17) y un grupo control (n=17), usando miR-16-5p como control endógeno. Las variables antropométricas y demográficas fueron similares en ambos grupos de estudio. Los niveles de glóbulos blancos, linfocitos, eritrocitos y hemoglobina están disminuidos en pacientes con LLA en comparación al grupo control. Los niveles circulantes en plasma de miR-1290 muestran una diferencia marginalmente significativa en su expresión en pacientes con LLA comparado con el grupo control (p=0.06), mostrando una tendencia al incremento en el grupo de pacientes con LLA, además, las mujeres con LLA muestran una mayor expresión de miR-1290 comparado con el grupo control, y a su vez, los pacientes que muestran mayor expresión de dicho miRNA, mostraron recaída, sin embargo no hay una asociación significativa entre dichas variables.En contraste, miR-26b no muestra diferencia entre los grupos de estudio. Se analizó la correlación lineal entre los niveles de expresión de miR- 1290 y el valor absoluto de NAT1 (r=-0.13 p=0.65) así como entre la expresión relativa de NAT1 y linfocitos en el grupo control. (r=-0.59, p=0.02). miR-1290 circulante es un potencial mecanismo de regulación epigenética de la expresión de NAT1 en LLA. Estudios adicionales permitirán proponer un rol para miR-1290 como biomarcador pronóstico o posible blanco terapéutico en LLA.

Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is one of the most common malignancies in children between ages 5 and 14 years. Modifications on the expression or activity of drug and xenobiotic metabolizing enzymes like NAT1, could be associated with the risk of cancer. Epigenetic regulation plays an important role on the development and progression of this disease; one important epigenetic mechanism are miRNAs, that serve as important regulators of gene expression. Aberrant expression of miRNAs could affect the expression of their target genes, like NAT1, contributing to ALL. We aim to evaluate the levels of circulating microRNAs miR-1290 and miR-26b in plasma of pediatric patients with B-ALL and determine if there is a difference in their expression compared to control subjects. The expression levels of miR-1290 and miR-26b in plasma were detected by RT-qPCR. In plasma of patients wit B-ALL (n=17) and control subjects (n=17), miR 16-5p was used as engogenous control. Realtive expression was determinated with the 2–ΔCt method. Hematologic parameters were evaluated and associated with the absolut value of NAT1 by Spearman correlation. Last, expression levels of miR-1290 were associated with the absolut value and activity of NAT1. There was no difference in demographic and anthropometric measures between study groups (p>0.05). Hematologics measures that showed decrease in ALL patients were white blood cells, lymphocites, erythrocytes and hemoglobin concentration. Only miR-1290 was found to show a trend to be overexpressed in ALL patients compared to control subjects (p=0.06) with a fold-change of 3.5, meanwhile miR- 26b showed no difference in its expression between both groups of study (p=0.43). Association between expression of miR-1290 and activity and absolut value of NAT1 (r=- 0.13 p=0.65) Negative association was found between relative expresion of miR-1290 and lymphocites in control group (r=-0.59, p=0.02). Our study showed that circulating miR-1290 in plasma as a posible epigenetic mechanism of NAT1 regulation, differed in its expression in ALL patients. However, more studies are required to propose a rol of miR-1290 as a biomarker of prognosis and therapy in ALL.