Evaluación de los componentes del Sistema Renina-Angiotensina (RAS) en leucocitos de pacientes con DMT2

Abstract

Introducción. La diabetes mellitus tipo 2 (DMT2) presenta distintas alteraciones metabólicas que favorecen el desarrollo de hiperglucemia. El estado de control glucémico representa uno de los determinantes de la progresión de la enfermedad, ya que la hiperglucemia favorece la activación de vías relacionadas con el daño celular. Entre las células involucradas se encuentran los monocitos clásicos (CD14+ CD16-), que expresan localmente la enzima convertidora de angiotensina (ACE), cuya activación conduce a la generación de angiotensina II (Ang II), la cual ejerce una respuesta inflamatoria y a su vez, contribuye al estado de inflamación crónica de bajo grado característico de la DMT2, que, en conjunto con otras alteraciones, favorece el desarrollo y progresión de la enfermedad. Objetivo. Evaluar la expresión y la actividad de la ACE en monocitos clásicos de individuos sanos y pacientes con DMT2 clasificados según su control glucémico. Metodología. Se realizó un estudio observacional, analítico, comparativo y de corte transversal con tres grupos: individuos sanos y pacientes con DMT2 clasificados de acuerdo a su control glucémico. Se evaluó el porcentaje de monocitos clásicos ACE+ por FACS. Posteriormente, los monocitos clásicos se aislaron por separación inmunomagnética y se evaluó la actividad de ACE mediante la incubación con angiotensina I (Ang I), cuantificando la producción de Ang II mediante ELISA. Se determinó la expresión génica de ACE, AT1R y MasR mediante RT-qPCR. Resultados. Los pacientes con DMT2 mostraron un mayor porcentaje de monocitos clásicos ACE+ (p=0.0306), además de un incremento de la actividad de la enzima, evidenciado por una mayor producción de Ang II, principalmente en los pacientes con DMT2 con control glucémico inadecuado (p=0.0416). Por otro lado, los pacientes con DMT2 presentaron una disminución en la expresión génica relativa de ACE (p=0.0217) y un incremento en la expresión de MasR (p=0.0245); mientras que la expresión de AT1R no mostró diferencias entre los grupos. Conclusión. La DMT2 se asocia con un incremento en la participación del eje proinflamatorio ACE/Ang II, así como la activación de un mecanismo compensatorio caracterizado por el incremento de MasR a nivel génico.

Introduction. Type 2 Diabetes Mellitus is characterized by metabolic alterations, that promoted the development of chronic hyperglycemia. Glycemic control is one of the main determinants of disease progression, as prolonged hyperglycemia promotes the activation of signaling pathways associated with cellular damage and inflammation. Among the immune cells involved in these processes are classical monocytes (CD14++ CD16-), wich play a key role due to their migratory capacity and early participation in the inflammatory response. These cells locally express Angiotensin-Converting Enzyme (ACE), which catalyzes the conversion of Ang I into Ang II. Through activation of its receptor promote a proinflammatory response that contribute the chronic low grade inflammatory state characteristic of T2D, together with other metabolic alterations, favor to disease development and progression. Objective. To evaluate the expression and activity of ACE in classical monocytes (CD14++, CD16-) from healthy controls and patients with T2D with different levels of glycemic control. Methods. A comparative study was conducted including three groups: healthy individuals and patients with T2D classified according to adequate or inadequate glycemic control. The percentage of ACE+ classical monocytes was evaluated by flow cytometry. Classical monocytes were isolated using a Miltenyi Biotec Kit, by immunomagnetic separation based in negative selection and ACE functional activity was assessed by culturing classical monocytes with the Ang I peptide and subsequently quantifying Ang II production by ELISA. In addition, the relative gene expression of ACE, AT1R and MasR was determined by RT-qPCR- Results. Patients with T2D exhibited increased ACE protein expression, as well as increased ACE activity, particularly in those with inadequate glycemic control. In contrast, patients with T2D showed a significant decrease in ACE gene expression and an increase MasR gene expression. Conclusion. T2DM is associated with increased to the participation of the proinflammatory ACE/Ang II axis, as well as the activation of a compensatory mechanism characterized by increased MasR gene expression.